Cultivo en suspensión de células vegetales

Cultivo de células en frascos agitados

Los frascos agitados se utilizan principalmente para desarrollar cepas y optimizar medios, ya que muchos experimentos se pueden ejecutar de forma rentable y en paralelo. Un sistema de impulsión apropiado y suave operado a bajas velocidades de agitación asegura que las suspensiones de células vegetales sensibles al esfuerzo de corte tengan suficiente oxígeno disponible. La optimización de las condiciones de cultivo en todo el bioproceso es un prerrequisito para obtener resultados reproducibles de un cultivo. De ello se deduce que un agitador con incubación que ha sido optimizado para cultivos de células vegetales permita a los operadores controlar con precisión la alimentación de CO₂ y la humedad. La excelente uniformidad de temperatura también es importante.

Células vegetales en un biorreactor

Al igual que con otros procesos de cultivo celular, la mezcla suave y la gasificación precisa también juegan un papel crucial en las suspensiones de células vegetales. Incluso pequeños cambios en la composición del gas alterarán el metabolismo de las células vegetales, lo que, a su vez, cambiará el comportamiento de crecimiento y la producción de metabolitos secundarios. El monitoreo y el control precisos de la composición del gas crea condiciones constantes y óptimas. Debido a que las células son muy sensibles a los esfuerzos de corte, el agitador utilizado debe ser capaz de mezclar completamente, incluso a medida que aumenta la viscosidad, mientras se mantiene baja la entrada de energía y la distribución de energía es uniforme.

Condiciones de cultivo controladas

La calidad y cantidad de sustancias bioactivas fluctúa cuando se aíslan de plantas enteras (in vivo). Sin embargo, cultivar células vegetales in vitro hace posible la producción reproducible en condiciones controladas. Una gran cantidad de factores químicos y físicos entran en juego al optimizar las condiciones de cultivo. Estos incluyen la composición del medio nutritivo, fitohormonas, pH, temperatura, gases, entrada de energía e iluminación.

Determinación de biomasa

Debido a que las células vegetales a menudo forman agregados en cultivos en suspensión, las mediciones clásicas de DO no ofrecen resultados definitivos de determinación de biomasa. La medición de la absorción de luz (retrodispersión) se ha establecido como un método alternativo de determinación de biomasa. Otra ventaja de este método de medición es que está disponible comercialmente como una solución en línea para biorreactores y agitadores por igual.